烧伤代谢和营养及免疫调控
重度烧伤小鼠脾脏凝溶胶蛋白含量和mRNA表达及T淋巴细胞增殖活性的变化
中华烧伤杂志, 2017,33(08) : 481-485. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.08.005
摘要
目的

研究重度烧伤小鼠脾脏凝溶胶蛋白(GSN)含量和mRNA表达及T淋巴细胞增殖活性的变化,选择GSN的最佳干预时间。

方法

取80只雄性BALB/c小鼠,按随机数字表法分为假伤组和烧伤组,每组40只。烧伤组小鼠造成背部15%TBSAⅢ度烫伤(下称烧伤),伤后即刻皮下注射生理盐水1 mL,背部涂适量碘伏防治感染,每日1次。假伤组小鼠致假伤,伤后不补液、不外涂碘伏。分别于伤后0(即刻)、8、24、48、72 h,每组各取8只小鼠,无菌留取脾脏,噻唑蓝比色法检测脾脏T淋巴细胞增殖活性,ELISA法检测脾脏组织中GSN含量,实时荧光定量RT-PCR法检测脾脏组织中GSN mRNA表达。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、LSD检验及Bonferroni校正。

结果

(1)2组小鼠伤后0 h的脾脏T淋巴细胞增殖活性无明显差异(P>0.05),假伤组小鼠伤后8、24、48、72 h脾脏T淋巴细胞增殖活性显著高于烧伤组(P值均小于0.05)。假伤组小鼠伤后各时相点脾脏T淋巴细胞增殖活性无明显差异(F=0.756,P>0.05);烧伤组小鼠伤后8 h脾脏T淋巴细胞增殖活性为0.12±0.04,显著低于组内伤后0、24、48、72 h的0.73±0.07、0.56±0.07、0.51±0.09、0.59±0.07(P值均小于0.05)。(2)2组小鼠伤后0 h脾脏组织中GSN含量无明显差异(P>0.05),假伤组小鼠伤后8、24、48、72 h脾脏组织中GSN含量显著高于烧伤组(P值均小于0.05)。假伤组小鼠伤后各时相点脾脏组织中GSN含量无明显差异(F=1.083,P>0.05);烧伤组小鼠伤后8 h脾脏组织中GSN含量为(11.9±2.6)pg/mg,显著低于组内伤后0、24、48、72 h的(37.7±2.9)、(19.9±4.0)、(24.1±4.1)、(24.6±4.0)pg/mg(P值均小于0.05)。(3)2组小鼠伤后0 h脾脏组织中GSN mRNA表达量无明显差异(P>0.05),假伤组小鼠伤后8、24、48、72 h脾脏组织中GSN mRNA表达量显著高于烧伤组(P值均小于0.05)。假伤组小鼠伤后各时相点脾脏组织中GSN mRNA表达量无明显差异(F=0.413,P>0.05);烧伤组小鼠伤后8 h脾脏组织中GSN mRNA表达量为0.307±0.064,显著低于组内伤后0、24、48、72 h的0.944±0.023、0.625±0.091、0.744±0.104、0.821±0.072(P值均小于0.05)。

结论

重度烧伤可导致小鼠脾脏GSN含量及mRNA表达、T淋巴细胞增殖活性显著下降,且三者均是在伤后8 h降至最低,可选择伤后8 h之前作为重度烧伤后GSN的最佳干预时间。

引用本文: 陈琦, 杨红明. 重度烧伤小鼠脾脏凝溶胶蛋白含量和mRNA表达及T淋巴细胞增殖活性的变化 [J]. 中华烧伤杂志,2017,33( 08 ): 481-485. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2017.08.005
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凝溶胶蛋白(GSN)是一种重要的肌动蛋白结合蛋白,通过对肌动蛋白丝的结合、切割和解聚等作用调控肌动蛋白的构建,并受钙离子浓度、细胞内pH值、磷脂酰肌醇等因素的调节,涉及多种复杂功能,包括肌动蛋白活力调节、细胞运动调控、细胞凋亡控制以及血小板的形成和活化等[1]。GSN参与了多种细胞的多种生物进程,与细胞凋亡、凝血、免疫、肿瘤及炎症等病理生理过程的发生发展密切相关[2]。早期对于GSN的功能研究主要涉及细胞凋亡及肿瘤等领域,其参与调控细胞凋亡的进程、使肿瘤细胞表达下调和加强细胞运动性等方面。近年来的动物实验和临床观察表明,GSN在烧/创伤、炎症等领域仍有广泛的研究前景,血浆GSN水平是外科危重症潜在的预后生物标志物,并可作为严重脓毒症早期诊断的依据之一[3]。且急危重症患者血浆GSN浓度的降低往往发生在其并发症出现之前,大量GSN消耗有助于延缓MODS的发生,血浆GSN水平可以用来预测烧伤患者的预后[4]。本研究在重度烧伤小鼠模型基础上,观察重度烧伤后小鼠脾脏GSN含量及mRNA表达随伤后时间的变化趋势是否与脾脏T淋巴细胞增殖活性有共同点,为重度烧伤后选择GSN干预的最佳时间提供依据。

 
 
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烧伤
凝溶胶蛋白
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细胞增殖
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